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實(shí)時(shí)熒光定量PCR預(yù)混液(2×SYBR Green Mix)

產(chǎn)品參數(shù)

產(chǎn)品參數(shù)

產(chǎn)品名稱 組成成分 規(guī)格 貨號
2×SYBR Green
qPCR預(yù)混液
熱啟動Taq酶、SYBR GreenⅠ、dNTP Mix、Mg2+、Enhancer、特殊穩(wěn)定劑和優(yōu)化的緩沖液 1 ml M107R1
5 ml

產(chǎn)品特征

靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。

特異性強(qiáng):采用熱啟動酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增 。

重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,受干擾影響少。

擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,起峰快,效率高。

產(chǎn)品應(yīng)用

1)基于熒光定量PCR檢測;

2)核酸擴(kuò)增和基因表達(dá);

3)自動化和高通量的定量基因分型研究;

4)基因組學(xué)相關(guān)應(yīng)用。

使用方法

(1)qPCR反應(yīng)體系配制

試劑 50μl 20 μl
SYBR Green預(yù)混液 25 μl 10 μl
Forward Primer(10 μM) 1 μl 0.4 μl
Reverse Primer(10 μM) 1 μl 0.4 μl
模板DNA X μl X μl
無菌超純水 Up to 50 μl Up to 20 μl

(2)PCR 反應(yīng)條件

95℃ 15min 預(yù)變性
95℃ 10 Sec 循環(huán)反應(yīng)(40 cycles)
55~60℃ 20 Sec
72℃ 20 Sec
95℃ 15 Sec 融解曲線
60℃ 60 Sec
95℃ 15 Sec

(3)qPCR反應(yīng)有效性確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)

1)線性關(guān)系以及擴(kuò)增效率確認(rèn):
標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)(R2)>0.98
標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率介于 -3~-3.5之間
PCR擴(kuò)增效率(E)介于0.9~1.2之間。

2)重復(fù)性確認(rèn):
重復(fù)管之間的STD<0.2

注:詳細(xì)操作流程參照說明書。

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

案例介紹

(1)擴(kuò)增曲線

歐凱生物的實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒的擴(kuò)增曲線比對圖

圖1. 歐凱生物,國產(chǎn)試劑,進(jìn)口試劑以及三者比較擴(kuò)增曲線對比圖。由圖1可以看出,在同樣的擴(kuò)增條件下,歐凱生物的SYBR Green Mix起峰快,Ct值低,可重復(fù)性好,擴(kuò)增效率高。

(2)熔解曲線

歐凱生物的實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒的熔解曲線比對圖

圖2. 歐凱生物,國產(chǎn)試劑,進(jìn)口試劑以及三者比較熔解曲線圖。由圖2可以看出,在同樣的條件下,歐凱生物的熔解曲線單一峰,具有特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、靈敏度高。

(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線

歐凱生物的實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線比對圖

圖3.歐凱生物,國產(chǎn)試劑,進(jìn)口試劑對比圖。歐凱生物的SYBR Green Mix使定量PCR可以在寬廣的定量范圍內(nèi)獲得良好的線性關(guān)系。

原始數(shù)據(jù)如下:

歐凱生物的實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒檢測的原始數(shù)據(jù)

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

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